本规范适用于以大豆或大豆粕为质料,经脱脂、提取、纯化、灭菌、枯燥等工艺出产的食物添加剂可

  本规范所用试剂和水在未注明其他要求时,均指剖析纯试剂和GB/T 6682规则的三级水。实验中

  所用规范溶液、杂质测定用规范溶液、制剂和制品在未注明其他要求时,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规则制备。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂制造时,均指水溶液。

  A.2.5.1 规范曲线μL规范相对分子质量溶液(A.2.2.3)注入高效液相色谱仪,进行高效液相色谱剖析,记

  录色谱峰保存时刻tR(min)。用lg(MW)对色谱峰保存时刻作规范曲线 规范品相对分子质量与保存时刻测定规范曲线 试样溶液制备

  在相同条件下,取10μL试样溶液(A.2.5.2)注入高效液相色谱仪,进行高效液相色谱剖析,记载色

  谱峰保存时刻tR(min)。依据保存时刻tR(min)在图A.1中查出试样液各峰lg(MW)并核算出 MW。

  可溶性大豆多糖典型高效液相色谱图见图A.2,其间4个峰相对分子质量范围分别为4.00×105~

  6.50×105、1.00×105~3.00×105、1.50×104~3.50×104、2.00×103~1.00×104。假如试样溶液高效液相色谱图呈现2~4个色谱峰,而且峰值在上述相对分子质量范围内,则判别试样是可溶性大豆多糖。

  假如谱图中色谱峰是1个,或许色谱峰是2~4个,但峰值不在上述相对分子质量范围内,则判别试样不

  试样经酶解,搜集滤液并用乙醇沉积,过滤、洗刷残渣并枯燥至恒质后,减去其间蛋白质、灰分和试

  箱贮存,酶的活性测定及断定规范应契合GB 5009.88-2014附录A的要求。

  贮存,酶的活性测定及断定规范应契合GB 5009.88-2014附录A的要求。

  24℃时调pH为8.2,28℃时调pH为8.1,20℃~28℃之间其他室温用插入法校对pH。加水稀释至

  A.3.4.4 过滤坩埚:孔径40μm~60μm,清洗后的坩埚在525℃马弗炉中灼烧6h,炉温降至130℃以

  下取出,于重铬酸钾洗液中室温浸泡2h,用水冲刷洁净,再用15mL丙酮冲刷后风干。用前,参加约

  A.3.4.5 真空抽滤设备:真空泵或有调理设备的抽吸器。备1L抽滤瓶,侧壁有抽滤口,带有与抽滤瓶

  彻底涣散在缓冲液中(拌和均匀,避免试样结成团块,以避免试样酶解过程中不能与酶充沛触摸)。一起

  A.3.5.2 热安稳α-淀粉酶酶解:用移液枪向试样液平分别参加50μL热安稳α-淀粉酶液(A.3.2.4),用

  铝箔掩盖(或加盖表面皿)后置于95℃水浴锅中持续拌和,当水浴温度升至95℃开端计时,接连反响

  30min。将烧杯取出,冷却至60℃,翻开铝箔盖,用刮勺悄悄将附着于烧杯内壁上的胶状物刮下,并用

  A.3.5.3 蛋白酶酶解:将试样溶液置于60℃水浴中,向每个烧杯中参加100μL蛋白酶溶液(A.3.3.3),

  用铝箔掩盖(或加盖表面皿)后接连拌和,反响30min。翻开铝箔盖,边拌和边参加5mL0.6mol/L盐

  酸溶液,在60℃条件下,用1mol/L盐酸溶液调理试样溶液pH至4.0~4.7。

  A.3.5.4 淀粉葡萄糖苷酶酶解:参加300μL淀粉葡萄糖苷酶液(A.3.2.6),用铝箔掩盖(或加盖表面皿)

  坩埚中的硅藻土,并用抽滤设备将硅藻土均匀铺在坩埚滤层上,持续抽气,将上述酶消化液转移至坩埚

  中抽滤。用10mL70℃水洗刷烧杯、残渣两次。兼并滤液并转移至预先称量的500mL高型烧杯中,

  A.3.5.6 沉积:参加4倍于滤液体积并预热至60℃的95%乙醇,或用水将滤液调整至总质量为80g

  藻土均匀铺在坩埚滤层上,持续抽气,将经醇处理的酶消解液悉数转移至过滤坩埚中抽滤,并用78%的

  A.3.5.8 洗刷:用15mL78%乙醇溶液洗刷残留物两次,再用15mL95%乙醇洗刷残留物两次,之后

  用丙酮15mL洗刷残留物两次,抽滤去除洗刷液后,将含有残留物的坩埚及硅藻土置于105℃烘箱中

  枯燥过夜,将坩埚置枯燥器中冷却0.5h后,称量(m1),准确到0.1mg。

  A.3.5.9 蛋白质和灰分的测定:取两份试样中的一份按GB 5009.5测定氮(N)含量,以6.25为换算系

  数,核算残留物中蛋白质质量(m3)。别的一份试样测定灰分,即在525℃马弗炉中灼烧5h,于枯燥器

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